Còn được gọi là khoang màng nhĩ, tai giữa là một không gian chứa đầy không khí, có màng lót nằm giữa ống tai và ống Eustachian, ốc tai và dây thần kinh thính giác. Màng nhĩ ngăn cách không gian này với ống tai. Khu vực được điều áp.
Màng nhĩ đóng vai trò như một ranh giới tự nhiên giữa tai giữa và ống tai. Áp suất trong tai giữa được duy trì thông qua các ống Eustachian, được đóng lại khi không sử dụng. Mỗi khi một người nuốt, các ống Eustachian sẽ mở ra và cho phép không khí trong lành đi vào khoang màng nhĩ. Điều này duy trì một gradient áp suất không đổi. Đôi khi, áp suất này không cân bằng với môi trường bên ngoài đầu và đây thường là lý do tại sao một số người cảm thấy khó chịu khi ngồi trên máy bay và ở độ cao lớn hơn.
Khoang cũng đóng một vai trò rất quan trọng đối với khả năng nghe của một người. Bên trong tai giữa, ba xương nhỏ (ossicles) tạo thành một chuỗi và dẫn truyền các rung động âm thanh từ màng nhĩ đến tai trong. Khi ở trong tai trong chứa đầy chất lỏng, âm thanh sẽ được chuyển đổi thành các xung thần kinh và gửi đến não.